Журнал. Вестник офтальмологии № 6 — 2020 г.
Оригинальные статьи
Original articles
матически находилась на границе типичного пре дела обнаружения для ЭДС (0,1 вес. %), исклю чали из статистической обработки: Mg, Al, К — для склеры и трабекулы, С1 —для склеры. Данные о содержании химических элементов приводили к 100% весу по каждому образцу. Отдельно для образцов трабекулы, полученных в ходе непроникающей глаукомной хирургии (не проникающей глубокой склерэктомии с частичной трабекулэктомией ab externo), с целью изучения про странственного распределения химических элемен тов проводили химическое микрокартирование с вы держкой в 3000 с; получали изображения 1024x768 рх (63,45 nm/рх). Микрокартирование трабекулярной ткани in vitro выполнено на образцах 27 пациентов (27 глаз) (13 (48%) мужчин и 14 (52%) женщин) в воз расте 73 (64; 78) лет с глаукомой II—III стадии на мак симально возможной местной гипотензивной тера пии, из них с ПОУГ II стадии — 8 пациентов (8 глаз), с ПОУГ III стадии — 19 пациентов (19 глаз). При этом в 4 образцах трабекулярной ткани обнаружена обли терация минеральными депозитами. При микрокар тировании на освобожденной от фосфатов поверх ности была выявлена импрегнация ткани остаточ ными микросферами фосфата кальция. Описанные нетипичные образцы были исключены из последу ющего анализа. Учитывая неоднородную поверхность анализи руемых фрагментов ткани, невозможность рассчи тать весовую долю водорода, обусловленную са мой методикой ЭДС -анализа, а также отсутствие эталонов для биологических образцов, метрологи ческий класс выполненного анализа характеризо вали как «качественный» и лишь в определенных случаях как «полуколичественный». В ряде случаев при иллюстрации зависимостей мы не переходили от условных концентраций элементов к оценке их весовых содержаний, чтобы избежать умножения квантового шума анализа. Статистическую обра ботку осуществляли, используя программы Excel (M icrosoft) и Statistica 12.6 (StatSoft). Критерием исключения выбросов из статистического анализа являлось смещение среднего значения всей выбо рочной совокупности единичным измерением бо лее чем на 5%. Принимая в расчет близость регистрируемых нами значений химических элементов к пределу об наружения детектором, а также качественный харак тер анализа, распределение каждого оцениваемого параметра по умолчанию не относили к нормальному закону, даже в случае прохождения теста на нормаль ность распределения. Исходя из этого, при анализе корреляции использовали критерий Спирмена. Сред ние данные приводили в виде медианы (Me) и ин- терквартильного размаха Me (Q25;Q75). В качестве критериев оценки статистически значимых различий определяли вероятность ошибки /КО,05.
патологического материала дренажной зоны глаза с применением как качественного, так и количе ственного (или полуколичественного) методов хими ческого анализа. Учитывая подтвержденное влияние ретенции на уровне трабекулярной сети на патогенез ПОУГ [3], изучение субстанций, затрудняющих от ток ВГЖ, может стать ключом к созданию новой па тогенетически ориентированной медикаментозной терапии, направленной на элиминацию патологи ческих веществ УПК. Материал и методы В рамках кро с с -с екци онн о го исследования был проведен химический анализ ткани трабекулы и склеры у пациентов с ПОУГ на фоне применения максимально возможной гипотензивной терапии. Забор тканей склеры и трабекулы у пациентов осу ществляли в ходе антиглаукомной операции (синус- трабекулэктомии). Исследование in vitro выполнено на образцах: — трабекулярной ткани, взятой у 89 пациентов (89 глаз), из которых 48 (54%) женщин и 41 (46%) мужчина в возрасте 71 (65; 76) года: со II ста дией — 33 человека, с III — 56; —склеры, взятой у 40 пациентов (40 глаз), из ко торых 27 (68%) женщин и 13 (32%) мужчин в воз расте 70,5 (65; 76) года: со II стадией — 15 человек, с I I I - 2 5 . Всем пациентам проводили стандартное офталь мологическое обследование, включавшее визомет- рию, биомикроскопию, гониоскопию, офтальмоско пию и периметрию. Статическую периметрию прово дили с помощью анализатора поля зрения Humphrey Field Analyzer II 750i (Zeiss, Германия). Стадию глау комы оценивали по классификации А.П. Нестерова. Уровень роговично-компенсированного внутриглаз ного давления (ВГД) измеряли за 2—4 ч до хирурги ческого вмешательства с использованием прибора Reichert 7CR (Reichert, США). Анализ ткани проводили с помощью микро скопа EVO LS 10 (Zeiss, Германия). Для всех об разцов получали изображения в режиме низкого вакуума (ЕР , 70 Па) при ускоряющем напряж е нии 21,5 кВ и токе на образце 420 пА на детекторе обратно рассеянных электронов (BSE), при кото ром яркость изображения соотносится со значе нием атомного номера элемента в ткани. Химичес кий микроанализ (валовый и микрокартирование) проводили при помощи энергоди сп ерсионного рен тгеновского спектрометра (ЭДС) Oxford X- Мах-50 (Oxford, Великобритания) с использова нием силы тока на образце 490—520 пА. Валовый анализ выполняли для выборочных химических элементов тканей склеры и трабекулы: С, N, О, А1, Са, С1, К, Mg, Na, Р, Si, S. Элементы, весовая доля которых по результатам валового анализа систе
7
RUSSIAN ANNALS OF OPHTHALMOLOGY 6, 2020
Made with FlippingBook Online newsletter creator